Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 27(1):60-65. DOI 10.32895/hcjm.m.2024.01.09
Lượt xem: 91 Lượt tải PDF: 10
Nguyễn Hoàng Quân1, Huỳnh Thị Kim Loan1, Đào Huy Mạnh1, Huỳnh Phương Thảo1, Hoàng Thị Như Đào1, Phạm Thị Thu Hằng1, Vũ Phạm Hồng Châu1, Nguyễn Hoàng Anh1, Nguyễn Trung Hiếu1, Nguyễn Thị Ngọc Thảo1, Nguyễn Vũ Thượng1, Phạm Duy Quang1
Đặt vấn đề: Trong năm 2021, Việt Nam ghi nhận 1.729.792 ca mắc COVID-19, trong đó 1.726.428 ca ghi nhận trong nước và 32.133 ca tử vong. Riêng giai đoạn 4, đã có hơn 1,7 triệu ca mắc, trên 32 nghìn ca tử vong. Kỹ thuật trung hòa giảm đám hoại tử (PRNT) là phương pháp chuẩn trong nghiên cứu huyết thanh học và đánh giá hiệu quả của vắc xin.
Mục tiêu: Chúng tôi tiến hành xây dựng quy trình PRNT phát hiện kháng thể trung hòa vi rút SARS-CoV-2 nhằm xét nghiệm chẩn đoán, giám sát, nghiên cứu bệnh tại Viện Pasteur Thành phố Hồ Chí Minh
Phương pháp: Quy trình thực hiện trên phiến nhựa 12 giếng, dùng tế bào Vero E6 với nồng độ là 2,5 × 105 tế bào/giếng, huyết thanh bệnh nhân được pha loãng bậc 2 từ độ pha loãng 1:10 và chủng vi rút được sử dụng nồng độ là 2,5 × 103 đơn vị tạo đám hoại tử (PFU)/mL.
Kết quả: Quy trình được đánh giá độ đặc hiệu trên 43 mẫu thu thập trước khi dịch xảy ra trong đó có 13 mẫu có kháng thể kháng Flavivirus. Quy trình không phản ứng với Flavivirus và các mẫu thu nhận trước vụ dịch. Quy trình tương đồng với phương điện hóa phát quang Anti-SARS-CoV-2 (Elecsys®, Roche) trên 80 mẫu với hệ số kappa k = 0,53; p (Mc Nemar test) = 0,108.
Từ khóa: xây dựng quy trình, PRNT, SARS-CoV-2, kháng thể trung hòa, plaque
Background: In 2021, Viet Nam recorded 1,729,792 cases of COVID-19, of which 1,726,428 cases were recorded domestically and 32,133 deaths. In phase 4 alone, there have been more than 1.7 million cases and over 32 thousand deaths. It is generally accepted that the plaque reduction neutralization test (PRNT) is the gold standard method in serological studies and for the evaluation of vaccine efficacy.
Objective: We developed a standard procedure to quantify neutralizing antibodies to SARS-CoV-2 for testing, diagnosis, surveillance, and research on SARS-CoV-2 at Pasteur Institute in Ho Chi Minh City
Methods: The assay procedure was performed on a 12-well plate, using Vero E6 cells cultured with a cell concentration of 2.5×105 cells/well. Patient’s serum was log2-diluted from a 1:10 dilution, and the concentration of the virus strain used was 2.5×103 PFU/mL.
Results: With regard to the evaluation of the specificity of PRNT, there was no cross-reactivity with Flavivirus and no reaction with 43 blood samples collected before the outbreak. By testing 80 sera, results of this procedure were relatively comparable to that of the Elecsys® Anti-SARS-CoV-2 electroluminescence (Roche) (k=0.53, p (McNemar test) = 0.108).
Keywords: PRNT, SARS-CoV-2, plaque, neutralizing antibody
