Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 22(5):161. DOI
Lượt xem: 339 Lượt tải PDF: 22
Nguyễn Thị Thu Sương*, Nguyễn Thị Ngọc Mỹ**, Phạm Anh Vũ Thụy***
Mục tiêu: Xác định mức độ ảnh hưởng của axit boric ở các nồng
độ khác nhau lên khả năng sống của tế bào gốc dây chằng nha chu người
(hPDLSCs), nhằm cung cấp bằng chứng cho việc lựa chọn nồng độ
axit boric thích hợp để ứng dụng trong lâm sàng.
Vật liệu và phương pháp
nghiên cứu: Axit boric
được chuẩn bị thành các dung dịch có nồng độ 0,5%; 0,75%; 1%; 1,5%; 3% và 6%. Ảnh
hưởng của axit boric lên hPDLSCs được xác định bằng phương pháp MTT. hPDLSCs được
ủ với boric axit trong 24 giờ, sau đó, ủ trong dung dịch MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-YL)-2,5-diphenyl
tetrazolium bromide) trong 4 giờ để tạo tinh thể formazan. Dung dịch
Ethanol/DMSO được thêm vào để hòa tan tinh thể formazan và tạo dung dịch màu
tím hấp thu tại bước sóng 570 nm. Mức độ độc tính của axit boric được đánh giá
dựa theo tiêu chuẩn ISO 10993 - 5: 2009, kết hợp quan sát hình thái tế bào và tỷ
lệ tăng trưởng tương đối (relative growth rate - RGR).
Kết quả: Quan sát hình thái tế bào sau khi ủ trong dung
dịch axit boric 24 giờ ở các nồng độ thí nghiệm được ghi nhận như sau: Ở nồng độ
0,5% và 0,75%, tế bào đồng nhất, bám dính và trải đều, có ít tế bào co lại. Ở nồng
độ 1% và 1,5%, tế bào co lại nhiều, mật độ ít, bám dính thưa thớt trên bề mặt
đĩa nuôi. Ở nồng độ 3% và 6%, tế bào trải dài trên bề mặt đĩa nuôi, một số ít tế
bào co lại. Kết quả nghiên cứu cho thấy khi nồng độ axit boric tăng dần thì
trung bình RGR giảm tương ứng. Mức độ độc tính tế bào được xác định ở nồng độ
0,5% và 0,75% là cấp 1 (75% - 99%), ở nồng độ 1% và 1,5% là cấp 2 (50% - 74%), ở
nồng độ 3% và 6% là cấp 4 (1% - 24%).
Kết luận: Như vậy, theo tiêu chuẩn ISO 10993-5:2009, kết hợp
quan sát hình thái tế bào và tỷ lệ tăng trưởng tương đối nghiên cứu cho thấy
axit boric ở nồng độ 0,5% và 0,75% không gây độc cho hPDLSCs.
Từ khóa: Axit boric, độc tính tế bào, tế bào gốc dây chằng
nha chu người.
Objective: This study was conducted to determine the
dose-dependent effect of boric acid on the
viability of human periodontal ligament stem cells (hPDLSCs), thereby providing
the basis to select appropriate boric acid
concentrations for clinical application.
Materials and methods:
Boric acid was prepared in different concentrations of 0.5%,
0.75%, 1%, 1.5%, 3% and 6%. The effect of those solutions on hPDLSCs was
determined by the MTT method. The hPDLSCs were incubated with boric acid solutions
for 24 hours, then continuously with MTT solution (3- (4.5-dimethylthiazol-2-yl)
-2.5-diphenyl tetrazolium bromide) for 4 hours to promote the formation of
Formosan crystals. The Ethanol/DMSO solution was then added to dissolve the
Formosan crystals and generate a purple solution that was absorbed at a 570 nm
wavelength. The cellular toxicity grades were determined according to ISO 10993
- 5: 2009, simultaneously cell morphology and the relative
growth rate (RGR) were also observed.
Results: Cellular
morphology after incubation with boric acid solution
at different concentrations for 24 hours was performed as follows: At
concentrations of 0.5% and 0.75%, almost hPDLSCs were homogeneous, adherent and
uniformly spread while only a handful of cells shrinkage was observed. At
concentrations of 1% and 1.5%, the amount of shrinkage hPDLSCs was much more,
the less cellular density and sparse adhesion was also recorded on the plates
surface. At concentrations of 3% and 6%, these cells stretch over the cultured
surface, with a few contracted cells. After measuring the optical density at
570 nm and processing the data, the RGR values were classified according to the cytotoxicity grades in accordance with ISO 10993 -
5: 2009; Level 0 and 1 toxicity were confirmed as zero toxic to the cells. The
results supported that when the concentration of boric acid increases,
the average growth rate decreases correspondingly. Cellular toxicity was
determined at level 1 for 0.5% and 0.75% concentrations (75% - 99%), level 2
for 1% and 1.5% concentrations (50% - 74%); level 4 for 3% and 6%
concentrations (1% - 24%).
Conclusion: With the
results of cellular toxicity according to ISO 10993 - 5: 2009 in combination
with observed cells morphology and calculated RGR, boric acid at 0.5% and 0.75% concentrations were confirmed to be non-cytotoxic to
hPDLSCs.
Keywords: Boric acid,
cytotoxicity, human periodontal ligament stem cells.
